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發(fā)布時間：2022-04-01 16:12:06 作者：學(xué)術(shù)小編 來源：m.1888yd.cn
雜交液的成分主要影響了核酸雜交的復(fù)性動力學(xué)和熱穩(wěn)定性。 雜交液的基礎(chǔ)成分為：Denhardt’s溶液（Ficoll，BSA，PVP），異源核酸（如鯡精子DNA/tRNA/競爭DNA），磷酸鈉，EDTA，SDS，鹽離子，甲酰胺和硫酸葡聚糖，以及雜交探針。
原位雜交技術(shù)應(yīng)用于染色體、細(xì)胞和組織切片等樣品中進行核酸特異性檢測，與免疫組化技術(shù)的結(jié)合應(yīng)用，能將 DNA 、mRNA和蛋白水平上的基因活性與樣品的顯微拓?fù)湫畔⒔Y(jié)合起來。 1969年P(guān)ardue和Gall將放射性標(biāo)記的探針直接應(yīng)用于純化核酸的雜交，此后得益于分子克隆技術(shù)的發(fā)展，及不同探針標(biāo)記系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)的應(yīng)用，大大增加了原位雜交檢測的應(yīng)用靈活性和檢測靈敏度。
③RNA 雜交體穩(wěn)定性高，所以探針在雜交反應(yīng)中產(chǎn)生的信號較DNA 探針強，等優(yōu)點。 核酸的分子雜交可分成液相雜交和固相雜交兩大類。 液相雜交是將待檢測的核酸樣品和同位素標(biāo)記的雜交探針同時溶于雜交液中進行反應(yīng)，然后分離雜交雙鏈和未參加反應(yīng)的探針，用儀器計數(shù)并通過計數(shù)分析雜交結(jié)果。
1969年P(guān)ardue和Gall將放射性標(biāo)記的探針直接應(yīng)用于純化核酸的雜交，此后得益于分子克隆技術(shù)的發(fā)展，及不同探針標(biāo)記系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)的應(yīng)用，大大增加了原位雜交檢測的應(yīng)用靈活性和檢測靈敏度。 基于地高辛、生物素和熒光標(biāo)記分子的標(biāo)記和檢測系統(tǒng)是常見的原位雜交檢測方法。
